二．分光光度計有哪些不?的類型，不同種類的應(yīng)用領(lǐng)域有什么區(qū)別？

分光光度計有哪幾種不同的分類方式：

1.分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：（1）可見光分光光度計：測定波長范圍為400～760 nm的可見光區(qū)；（2）紫外分光光度計：測定波長范圍為200～400nm的紫外光區(qū)；（3）紅外分光光度計：測定波長范圍為大于760nm的紅外光區(qū)；（4）熒光分光光度計：用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜；（5）原子吸收分光光度計：光源發(fā)出被測的特征光譜輻射，被經(jīng)過原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態(tài)原子所吸收，通過測定特征輻射被m收的大小，來求出被測元素的含量。

2.分光光度計按自動化程度分類：可分為手動、半自動、自動分光光度計。

3.分光光度計按軟件可分為：帶掃描、不帶掃描。

三．分光光度計常見的用途和常用波長有哪些？

1.核m的定量

核酸的高吸收峰的吸收波長260 nm。利用260nm的波長可以定量測量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA的濃度。

除了核酸濃度，分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度m因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。

A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。

2.蛋白質(zhì)的直接定量

這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。

3.細(xì)菌細(xì)胞密度

細(xì)菌培養(yǎng)過程中，需要采用分光光度計準(zhǔn)確測定細(xì)菌細(xì)胞密度。

OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長的標(biāo)準(zhǔn)方法。在600nm波長下，以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，測量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。

四．幾種常見d分光光度計的用途有哪些區(qū)別？

（1）可見分光光度計

用來測量待測物質(zhì)對可見光（400～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計?？稍?00nm測定細(xì)菌細(xì)胞密度。

（2）紫外可見分光光度計

紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光（200～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。

紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。

單光束