
導(dǎo)讀
海鮮一向以唇齒留香的滋味被人們視為珍饈。不管是生活在海邊的居民,還是內(nèi)陸的小伙伴們,對(duì)于海鮮總是有一番特別深厚的情感。然而,近年來隨著海洋環(huán)境污染逐漸嚴(yán)重,海洋生物毒素對(duì)公共健康和海產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)的影響也越來越嚴(yán)重,尤其在沿海地區(qū)城市,如珠海、寧波、廈門、秦皇島、唐山等,貝類毒素中毒事件屢見報(bào)端。貝類毒素按其化合物性質(zhì)可分為脂溶性和水溶性兩大類。如今,包括脂溶性貝類毒素在內(nèi)的海洋生物毒素對(duì)海產(chǎn)品污染已成為食品安全相關(guān)部門急需解決的重要問題之一。那么,脂溶性貝類毒素如何檢測(cè)呢?一起來看看吧。
貝類毒素小知識(shí)
貝類毒素按照中毒癥狀主要分為四類,即麻痹性貝毒、腹瀉性貝毒、神經(jīng)性貝毒和記憶缺失性貝毒,按其化合物性質(zhì)則可分為脂溶性和水溶性兩大類,其中,脂溶性貝類毒素指在貝類脂肪組織富集而不易排出體外、具有熱穩(wěn)定性、易溶解于有機(jī)溶劑的一大類毒素,屬于多環(huán)聚醚類的脂溶性化合物,主要包括大田軟海綿酸毒素(OA)、鰭藻毒素(DTX)、蛤毒素(PTX)、蝦夷扇貝類毒素(YTX)和原多甲藻毒素(AZAs)等。這些毒素通過食物鏈進(jìn)入人體后,富集在脂肪組織內(nèi)不易代謝排出,導(dǎo)致慢性病的發(fā)生甚至?xí)T發(fā)腫瘤。下圖為AZA的基本結(jié)構(gòu)。美國(guó)對(duì)OA組和AZA組毒素的安全限量為160 μg/kg,歐盟在此基礎(chǔ)上還設(shè)置了PTX組和YTX組的安全限量,分別為160 μg/kg(PTX)和3750 μg/kg (YTX)。
原多甲藻酸毒素(AZA)結(jié)構(gòu)圖
島津解決方案
● 分析利器:三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀
島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀
本方案使用堿性流動(dòng)相分析扇貝萃取液中的脂溶性貝毒。萃取和分析步驟依據(jù)歐盟LC-MS/MS Ver.5測(cè)定軟體動(dòng)物中親脂性海洋生物毒素的統(tǒng)一操作流程。
● 方案特色:自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能
分析時(shí)可采用自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能,吸出5 μL扇貝基質(zhì)溶液,之后再吸出等量的各濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液后進(jìn)樣。對(duì)于實(shí)際樣品分析,吸取甲醇溶液來替代混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用該功能,在配制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可大大節(jié)省制備空白基質(zhì)的時(shí)間,并且軟件的自動(dòng)化功能使得結(jié)果具有更佳的重現(xiàn)性和線性。
自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能示意圖
● 方法學(xué)結(jié)果
下圖為標(biāo)準(zhǔn)曲線至低點(diǎn)處各化合物的色譜圖。
水解可將自然界貝類中存在的OA和DTXs的?;セ鶊F(tuán)轉(zhuǎn)化成游離形式,但水解處理后,PTX、AZA的毒素基團(tuán)將被分解而無法檢出,因此,AZA1、PTX2采用未水解的萃取液作為基質(zhì)溶液,其它物質(zhì)不論是否水解均可獲得95~104%的良好回收率。
表1. 定量結(jié)果和回收率
注:N.D.表示未檢出
結(jié) 語
貝類營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,味道鮮美,是大海饋贈(zèng)給人類的禮物,只是人們?cè)诖罂於漕U的同時(shí)也要小心毒素的殘留。通過在方法中設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能,可自動(dòng)配制高精度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線,扇貝中5種脂溶性貝類毒素的檢測(cè)方法靈敏度高、線性良好,加標(biāo)回收率高。
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