導(dǎo)讀

海鮮一向以唇齒留香的滋味被人們視為珍饈。不管是生活在海邊的居民，還是內(nèi)陸的小伙伴們，對(duì)于海鮮總是有一番特別深厚的情感。然而，近年來(lái)隨著海洋環(huán)境污染逐漸嚴(yán)重，海洋生物毒素對(duì)公共健康和海產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)的影響也越來(lái)越嚴(yán)重，尤其在沿海地區(qū)城市，如珠海、寧波、廈門(mén)、秦皇島、唐山等，貝類毒素中毒事件屢見(jiàn)報(bào)端。貝類毒素按其化合物性質(zhì)可分為脂溶性和水溶性兩大類。如今，包括脂溶性貝類毒素在內(nèi)的海洋生物毒素對(duì)海產(chǎn)品污染已成為食品安全相關(guān)部門(mén)急需解決的重要問(wèn)題之一。那么，脂溶性貝類毒素如何檢測(cè)呢？一起來(lái)看看吧。

貝類毒素小知識(shí)

貝類毒素按照中毒癥狀主要分為四類，即麻痹性貝毒、腹瀉性貝毒、神經(jīng)性貝毒和記憶缺失性貝毒，按其化合物性質(zhì)則可分為脂溶性和水溶性兩大類，其中，脂溶性貝類毒素指在貝類脂肪組織富集而不易排出體外、具有熱穩(wěn)定性、易溶解于有機(jī)溶劑的一大類毒素，屬于多環(huán)聚醚類的脂溶性化合物，主要包括大田軟海綿酸毒素（OA）、鰭藻毒素（DTX）、蛤毒素（PTX）、蝦夷扇貝類毒素（YTX）和原多甲藻毒素（AZAs）等。這些毒素通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體后，富集在脂肪組織內(nèi)不易代謝排出，導(dǎo)致慢性病的發(fā)生甚至?xí)T發(fā)腫瘤。下圖為AZA的基本結(jié)構(gòu)。美國(guó)對(duì)OA組和AZA組毒素的安全限量為160 μg/kg，歐盟在此基礎(chǔ)上還設(shè)置了PTX組和YTX組的安全限量，分別為160 μg/kg（PTX）和3750 μg/kg (YTX)。

原多甲藻酸毒素(AZA)結(jié)構(gòu)圖

島津解決方案

● 分析利器：三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀

島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀

本方案使用堿性流動(dòng)相分析扇貝萃取液中的脂溶性貝毒。萃取和分析步驟依據(jù)歐盟LC-MS/MS Ver.5測(cè)定軟體動(dòng)物中親脂性海洋生物毒素的統(tǒng)一操作流程。

● 方案特色：自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能

分析時(shí)可采用自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能，吸出5 μL扇貝基質(zhì)溶液，之后再吸出等量的各濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液后進(jìn)樣。對(duì)于實(shí)際樣品分析，吸取甲醇溶液來(lái)替代混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用該功能，在配制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可大大節(jié)省制備空白基質(zhì)的時(shí)間，并且軟件的自動(dòng)化功能使得結(jié)果具有更佳的重現(xiàn)性和線性。

自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能示意圖

● 方法學(xué)結(jié)果

下圖為標(biāo)準(zhǔn)曲線至低點(diǎn)處各化合物的色譜圖。

水解可將自然界貝類中存在的OA和DTXs的?；セ鶊F(tuán)轉(zhuǎn)化成游離形式，但水解處理后，PTX、AZA的毒素基團(tuán)將被分解而無(wú)法檢出，因此，AZA1、PTX2采用未水解的萃取液作為基質(zhì)溶液，其它物質(zhì)不論是否水解均可獲得95~104%的良好回收率。

表1. 定量結(jié)果和回收率

注：N.D.表示未檢出

結(jié) 語(yǔ)

貝類營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，味道鮮美，是大海饋贈(zèng)給人類的禮物，只是人們?cè)诖罂於漕U的同時(shí)也要小心毒素的殘留。通過(guò)在方法中設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣器的預(yù)處理功能，可自動(dòng)配制高精度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，扇貝中5種脂溶性貝類毒素的檢測(cè)方法靈敏度高、線性良好，加標(biāo)回收率高。

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