5月9-11日，由南方科技大學(xué)冷凍電鏡 與徠卡顯微系統(tǒng)（上海）貿(mào)易有限公司聯(lián)合舉辦的第二屆冷凍電鏡制樣培訓(xùn)班在南方科技大學(xué)成功舉行。來自南方科大、北大、南通大學(xué)、中科院生物物理所等單位的8名專家進(jìn)行報(bào)告交流，來自全國20余家高校、科研院所、企事業(yè)單位的技術(shù)代表參加了本次培訓(xùn)班。徠卡顯微系統(tǒng)的產(chǎn)品經(jīng)理王仁姚主持會議。

5月9日

進(jìn)行了全天的線下會議

南方科技大學(xué)冷凍電鏡 王培毅教授致歡迎辭，熱情的歡迎各位專家的到來，充分肯定了之前培訓(xùn)班的成效，還向參會專家介紹了南方科技大學(xué)冷凍電鏡 的概況并對冷凍電鏡技術(shù)的進(jìn)展做了簡要闡述。

徠卡顯微系統(tǒng)中國區(qū)總監(jiān)吳長發(fā)先生致辭，對南方科技大學(xué)冷凍電鏡 對本次活動的大力協(xié)助與支持表示衷心感謝！徠卡170多年來始終致力于推動顯微成像的技術(shù)進(jìn)步與創(chuàng)新，突破視覺極限，發(fā)現(xiàn)真相。吳長發(fā)先生還對徠卡助力中國基礎(chǔ)科學(xué)與生命科學(xué)研究寄語，希望徠卡與南方科技大學(xué)冷凍電鏡 合作共贏，希望通過培訓(xùn)班交流會使電鏡技術(shù)得到進(jìn)一步提升，對未來技術(shù)發(fā)展持續(xù)貢獻(xiàn)力量。

南方科技大學(xué)/同濟(jì)大學(xué)的祝建教授介紹和舉例高壓冷凍及冷凍替代技術(shù)在電鏡制樣中的應(yīng)用。高壓冷凍可以迅速轉(zhuǎn)移樣品的熱量，降低水的冰點(diǎn)，壓制冰晶成核和冰晶生長，固定較大的（200 µ）含有水分的組織樣品，保證樣品中的水分以玻璃化狀態(tài)存在的，較好地保存了細(xì)胞、組織真實(shí)的超微結(jié)構(gòu)。冷凍替代技術(shù)是高壓冷凍固定后向常溫技術(shù)過度的一種必不可少的脫水技術(shù)。其優(yōu)點(diǎn)是脫水慢，減少細(xì)胞變形和膜結(jié)構(gòu)的抽提等，在低溫—常溫的脫水過程中對樣品進(jìn)行二次固定（在常溫下維持高壓冷凍固定的結(jié)構(gòu)），大限度地保持細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的真實(shí)性。二種技術(shù)可以很好地與常規(guī)電鏡生物樣品制備相結(jié)合，具有廣泛的應(yīng)用前景。還簡要報(bào)告了高冷冷凍技術(shù)與Tokuyasu、冷凍超薄切片技術(shù)結(jié)合的優(yōu)勢。

中科院生物物理所成像 的高級工程師孫磊介紹了原位電鏡冷凍制樣。報(bào)告了高壓冷凍、冷凍含水切片等技術(shù)原理、操作和實(shí)驗(yàn)技巧，還與大家分享了自己的制樣經(jīng)驗(yàn)和注意事項(xiàng)。

北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院公共儀器 的高級工程師胡迎春根據(jù)自己開展Tokuyasu冷凍超薄切片免疫標(biāo)記技術(shù)的經(jīng)歷，結(jié)合實(shí)例，從原理、制樣方法、標(biāo)記步驟等方面為我們詳細(xì)介紹了此技術(shù)。

來自徠卡的南希為我們報(bào)告了基于人工智能的Aivia軟件，通過構(gòu)建一個(gè)二維至五維的圖像可視化、分析與數(shù)據(jù)詮釋完整平臺，使之能夠在幾分鐘內(nèi)可靠地處理和重建高度復(fù)雜的圖像。對于深入挖掘電鏡數(shù)據(jù)有著重要的意義。

南通大學(xué)特種醫(yī)學(xué)研究院的李霞教授為我們介紹了通過冷凍電子斷層掃描對哺乳動物完整細(xì)胞進(jìn)行高分辨率成像。報(bào)告提出了基于神經(jīng)生長因子分化適合于細(xì)胞器和分子的高分辨率原位成像的PC12+的模型系統(tǒng)，還詳細(xì)介紹了一種優(yōu)化的成像系統(tǒng)，該系統(tǒng)有效地結(jié)合了CLEM、Cryo-FBI、Cryo-ET等，以接近天然細(xì)胞環(huán)境中確定細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)。研究表明，PC12+系統(tǒng)的Cryo-ET成像為以高分辨率解剖哺乳動物細(xì)胞中的特定細(xì)胞過程提供了一種可及且有效的途徑。

南方科技大學(xué)冷凍電鏡 技術(shù)主管馬曉旻為我們介紹了沖入式冷凍制樣技術(shù)的原理、操作注意要點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)技巧，為我們利用單顆粒冷凍電鏡技術(shù)以解析大型動態(tài)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解決了基礎(chǔ)知識進(jìn)行了解疑。

徠卡共聚焦顯微鏡產(chǎn)品專家Jan Debock為我們報(bào)告了冷凍共聚焦光電聯(lián)用技術(shù)，在會上向我們展示了利用冷凍共聚焦光電聯(lián)用技術(shù)用于評估樣品質(zhì)量、安全的樣品轉(zhuǎn)移和低溫條件下的超分辨率成像，為準(zhǔn)確靶向提供了基礎(chǔ)。

徠卡的應(yīng)用專家鄧廣杰為我們介紹了激光掃描共聚焦顯微系統(tǒng)，簡要介紹了一個(gè)基于模塊化設(shè)計(jì)的激光共聚焦平臺，集成多種功能，提供準(zhǔn)確的三維成像及準(zhǔn)確的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及動態(tài)過程的成像，是好的醫(yī)藥研究的理想伙伴。

5月10-11日

進(jìn)行了上機(jī)實(shí)操培訓(xùn)

冷凍電鏡 聯(lián)合徠卡工程師安排了上機(jī)實(shí)操培訓(xùn)，讓大家近距離接觸了高壓冷凍EM ICE、冷凍傳輸系統(tǒng)EM VCT500、超薄切片機(jī)UC7/FC7、冷凍光電聯(lián)用CRYO CLEM、投入冷凍EM GP2、共聚焦STELLARIS 5以及人工智能軟件AIVIA。通過工程師的實(shí)時(shí)演示和解釋，以及參會師生的現(xiàn)場提問，取得了較好的交流互動效果，為生物成像實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和優(yōu)化、拓展研究思路以及開展合作研究等提供了直接的技術(shù)指導(dǎo)和展示交流機(jī)會。

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